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帕金森造模用動(dòng)態(tài)學(xué)穩(wěn)定的α突觸核蛋白寡聚體(SPR-484)

更新時(shí)間:2022-02-24   點(diǎn)擊次數(shù):718次

阿爾茲海默,帕金森和ALS為常見(jiàn)的神經(jīng)退行性疾病。在我國(guó)65歲以上人群發(fā)病率為5.56%,85歲以上老齡人口中有三分之一患有阿爾茲海默癥(AD)。然而該病目前沒(méi)有可靠的治愈方案,三種疾病的病人腦中都蛋白聚集現(xiàn)象,包括α-突觸核蛋白, tau, β淀粉樣肽 (Aβ) 和SOD1。α-突觸核蛋白, Tau, Aβ和SOD有相似的病變聚集機(jī)制。

 

α-突觸核蛋白, Tau, 和 Aβ 寡聚體被認(rèn)為是毒性更強(qiáng)的結(jié)構(gòu)。更有利于造模,stressmarq能夠提供商業(yè)投產(chǎn)α-突觸核蛋白寡聚體。加速帕金森模型的造模。


該產(chǎn)品有如下特點(diǎn):

● 高含量α-突觸核蛋白寡聚體

● 動(dòng)態(tài)學(xué)穩(wěn)定 (kinetically stable/trapped)

● 不含任何誘導(dǎo)劑或抑制劑 (多巴胺,EGCG)

● 可用于活性電泳 (Native PAGE),體內(nèi)體外檢測(cè)及疾病建模

● *量產(chǎn)


帕金森造模用動(dòng)態(tài)學(xué)穩(wěn)定的α突觸核蛋白寡聚體(SPR-484)*活動(dòng)

圖中為動(dòng)態(tài)學(xué)穩(wěn)定(kinetically stable) 的α-突觸核蛋白寡聚體(SPR-484) 電鏡圖。該寡聚體沒(méi)有使用任何誘導(dǎo)劑或抑制劑來(lái)鎖定寡聚體狀態(tài),并且寡聚體含量能達(dá)到90%。

 

SPR-484 的負(fù)染色透射電子顯微鏡圖像在 80 Kv 下使用磷鎢酸和醋酸鈾染色在碳涂層的 400 目銅網(wǎng)格上獲得??梢郧逦目吹焦丫垠w結(jié)構(gòu),并且具有很高的均勻性。

帕金森造模用動(dòng)態(tài)學(xué)穩(wěn)定的α突觸核蛋白寡聚體(SPR-484)*活動(dòng)

動(dòng)態(tài)學(xué)穩(wěn)定的α突觸核蛋白寡聚體(SPR-484) 在大鼠原代多巴胺能神經(jīng)元中誘導(dǎo)帕金森相關(guān)的pSer129病理現(xiàn)象


(A)用對(duì)照PBS緩沖液處理后11天的大鼠原代多巴胺能神經(jīng)元

(B) 用10 µg/mL SPR-484處理后11天的大鼠原代多巴胺能神經(jīng)元


細(xì)胞核染色藍(lán)色(Hoechst),多巴胺能神經(jīng)元顯示紅色(MAP2),病理現(xiàn)象為綠色(α-syn pSer129)

注:SPR-484為E.coli 表達(dá)的,在加入神經(jīng)元之前沒(méi)有磷酸化 


帕金森造模用動(dòng)態(tài)學(xué)穩(wěn)定的α突觸核蛋白寡聚體(SPR-484)*活動(dòng) 

動(dòng)態(tài)學(xué)穩(wěn)定的α突觸核蛋白寡聚體(SPR-484) 對(duì)多巴胺能神經(jīng)元有毒性并且可以誘發(fā)帕金森病理現(xiàn)象(pSer129)

 

(A) 經(jīng)寡聚體處理后 11 天,大鼠原代多巴胺能神經(jīng)元的存活率由抗 MAP2 抗體量化并表示為對(duì)照的百分比

(B) 經(jīng)寡聚體處理后 11 天,大鼠原代多巴胺能神經(jīng)元中存在的 α-突觸核蛋白 pSer129 水平通過(guò)抗 α-突觸核蛋白 pSer129 抗體與抗 MAP2 抗體的比率量化,表示為對(duì)照的百分比

 

所有數(shù)據(jù)經(jīng)過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)驗(yàn)證,而非偶然性結(jié)果 


● StressMarq 活性ASYN蛋白模型的優(yōu)點(diǎn)

● 由活性單體在特定環(huán)境下聚集形成PFFs,路易小體的主要成分

● 可以顯現(xiàn)出兩種病理特征

● 使內(nèi)源性ASYN S129位點(diǎn)超磷酸化,導(dǎo)致突觸功能障礙,甚至細(xì)胞死亡

● 運(yùn)動(dòng)缺陷出現(xiàn)沒(méi)那么快,有早期病理進(jìn)程

● 雖然ASYN含量也有增高但是更接近人類PD病理狀況

● 相比其它模型,活性ASYN注射更接近實(shí)際PD病因進(jìn)程

● Micheal J Fox 科研機(jī)構(gòu)

● Polinski, Nicole K et al. “Best Practices for Generating and Using Alpha-Synuclein Pre-Formed Fibrils to Model Parkinson's Disease in Rodents.” Journal of Parkinson's disease vol. 8,2 (2018): 303-322. doi:10.3233/JPD-171248

 

 


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