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Tau 和 Alpha突觸核蛋白共聚集體原纖維
SPR-494,重組人Tau-352 (胚 胎 0N3R) 和 Alpha 突觸核蛋白 共聚集體原纖維 • StressMarq的共聚集體原纖維 是用兩種蛋白的單體共同孵育 形成的原纖維 • Tau 和 Asyn蛋白存在于同一條 纖維上 |
Tau-352 (胚胎 0N3R) 和 Alpha 突觸核蛋白共聚集體 原纖維(SPR-494)既可以 聚集Asyn單體也可以聚集 Asyn和Tau 蛋白單體的混合 物 • Tau蛋白單體也可以被聚集, 但是ThT信號不明顯 |
SPR-495,重組人Tau-441 (2N4R) 和 Alpha 突觸核蛋白共 聚集體原纖維 • StressMarq的共聚集體原纖維 是用兩種蛋白的單體共同孵育 形成的原纖維 • Tau 和 Asyn蛋白存在于同一條 纖維上 |
Tau-441 (2N4R) 和 Alpha 突 觸核蛋白共聚集體原纖維 (SPR-495)既可以聚集 Asyn單體也可以聚集Asyn和 Tau 蛋白單體的混合物 • Tau蛋白單體也可以被聚集, 但是ThT信號不明顯 |
Tau & Alpha 突觸核蛋白共聚集體原纖維 的免疫電鏡圖。6nm 膠體金信號來自α突 觸核蛋白,12nm 膠體金信號來自tau蛋 白??煽吹絻煞N信號同時出現(xiàn)在SPR-494 和SPR-495的單條纖維上。而對照組不會 同時出現(xiàn)兩種信號。 |
實(shí)驗(yàn)方法:原纖維被吸附到碳涂層銅網(wǎng)格上。網(wǎng)格用含1% BSA 和 0.1% Tween-20 的PBS 封閉,洗滌,然后依次在封閉緩沖液中用 20 µg/mL 的一抗孵育,洗滌,再在封閉緩沖液中用 20 µg/mL 的二抗孵育,洗滌并用2% 乙酸雙氧鈾作為負(fù)染色。 6nm(asyn)和 12nm(tau)信號同時出現(xiàn)在共聚集體原纖維樣品的同一原纖維鏈中,并且在對照 α- 突觸核蛋白或 tau 原纖維中未觀察到抗體交叉反應(yīng)。一抗:小鼠抗人asyn單克隆抗體(StressMarq SMC-532)和兔抗人tau多克隆抗體(StressMarq SPC-802);二抗:6nm 膠體金標(biāo)記的山羊抗小鼠抗體 (Jackson ImmunoResearch 115-195-146) 和 12nm膠體金標(biāo)記的山羊抗兔抗體 (Jackson ImmunoResearch 115-195-146)。
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