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酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法 (enzyme-linked immunosorbent assay),簡(jiǎn)稱為ELISA,是用于檢測(cè)體液中微量物質(zhì)的固相免疫測(cè)定方法。它是一種特殊的試劑分析方法,是在免疫酶技術(shù)( immunoenzymatic techniques ) 的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種新型的免疫測(cè)定技術(shù) 。ELISA技術(shù)現(xiàn)在已成為目前生物醫(yī)學(xué)、分析化學(xué)等領(lǐng)域中的常用實(shí)驗(yàn)方法 。
商品化ELISA試劑盒作為一種標(biāo)準(zhǔn)化、預(yù)先配置的實(shí)驗(yàn)室工具,用于定量或定性檢測(cè)樣本中的特定成分含量。這些試劑盒通常包含所有必要的組件來(lái)執(zhí)行ELISA實(shí)驗(yàn),在科研與工業(yè)領(lǐng)域均得到了廣泛的使用。
商品化ELISA試劑盒有以下幾點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
※ 標(biāo)準(zhǔn)化流程:標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)步驟,減少因?qū)嶒?yàn)操作者不同導(dǎo)致的差異性。
※ 質(zhì)量控制:制造商通常會(huì)對(duì)試劑盒進(jìn)行質(zhì)量控制,確保批間一致性。
※ 便捷性:試劑盒中包含的大部分組分都是預(yù)先配制好的,減少了實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備時(shí)間和在準(zhǔn)備組分中產(chǎn)生錯(cuò)誤的可能性。
※ 高通量:可用于同時(shí)檢測(cè)多個(gè)樣本,提高實(shí)驗(yàn)效率。
※ 靈敏度與特異性:優(yōu)化的抗體對(duì),提供高度靈敏和特異的檢測(cè)能力。
如何購(gòu)買(mǎi)合適的ELISA試劑盒也是一門(mén)學(xué)問(wèn),如果不慎購(gòu)買(mǎi)到不合適的ELISA試劑盒,不僅造成金錢(qián)損失,更會(huì)造成珍貴實(shí)驗(yàn)樣本的損耗。為了避免這種問(wèn)題,我們?cè)谙路綖槟偨Y(jié)了一些關(guān)于如何選取合適ELISA試劑盒的建議。
如何選取合適的ELISA試劑盒?
01 查找待測(cè)樣本的蛋白濃度
ELISA試劑盒通常有其特定的檢測(cè)范圍,如果樣本中的蛋白濃度過(guò)高或過(guò)低,可能會(huì)導(dǎo)致結(jié)果超出這個(gè)范圍,從而無(wú)法得到準(zhǔn)確的讀數(shù)。在購(gòu)買(mǎi)試劑盒前,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)或相關(guān)文獻(xiàn)資料獲得參考的檢測(cè)范圍。比如:若待檢測(cè)物濃度太低,可選擇購(gòu)買(mǎi)高敏試劑盒;若不確定待測(cè)濃度或樣本間濃度差異較大,建議使用檢測(cè)范圍更寬的ELISA試劑盒。
02 明確待測(cè)樣本的種屬、樣本類型
ELISA試劑盒中的抗體是針對(duì)特定物種的抗原設(shè)計(jì)的,不同物種間的抗原可能在結(jié)構(gòu)上有細(xì)微差別,這會(huì)影響抗體的識(shí)別能力。實(shí)驗(yàn)中,需要確保抗體與樣本中的抗原匹配。雖然有些抗體可能對(duì)多個(gè)物種的抗原有交叉反應(yīng),但這種反應(yīng)性通常在試劑盒說(shuō)明書(shū)中有所標(biāo)注,并且可能不如針對(duì)特定物種的抗體敏感或特異。因此,選擇與樣本種屬匹配的ELISA試劑盒可以避免假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果。標(biāo)準(zhǔn)曲線通?;谔囟ㄎ锓N的已知濃度抗原構(gòu)建,如果種屬不匹配,可能會(huì)影響標(biāo)準(zhǔn)品的適用性和結(jié)果的解讀。
不同的樣本類型(如血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、尿液、組織勻漿等)可能含有不同的干擾物質(zhì),如脂肪、纖維蛋白、酶抑制劑等,這些物質(zhì)可能影響ELISA的檢測(cè)效果。
在選購(gòu)試劑盒前,需要明確樣本的種屬來(lái)源(人,大鼠,小鼠等)與樣本類型(血漿,組織,細(xì)胞上清等),確認(rèn)選購(gòu)的試劑盒能用于待測(cè)樣本的檢測(cè)。
03 明確試劑盒的國(guó)際質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)
ELISA試劑盒的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)通常涉及到一系列的評(píng)估指標(biāo)和驗(yàn)證過(guò)程。常見(jiàn)的標(biāo)準(zhǔn)如:
1. 精密度(Precision):包括板內(nèi)精密度(Intra-assay Precision)和板間精密度(Inter-assay Precision)。前者反映的是同一實(shí)驗(yàn)板上多次重復(fù)測(cè)量的一致性,后者則是指不同實(shí)驗(yàn)板之間結(jié)果的一致性。精密度通常用變異系數(shù)(CV)來(lái)表示。
2. 靈敏度(Sensitivity):是指試劑盒能夠檢測(cè)到的最小濃度水平。靈敏度越高,試劑盒能夠檢測(cè)到的目標(biāo)分子的濃度越低,這對(duì)于低濃度的檢測(cè)非常重要。
3. 特異性(Specificity):特異性指的是試劑盒只對(duì)目標(biāo)抗原作出反應(yīng),而不與其他可能存在的相似抗原或干擾物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)的能力。
4. 穩(wěn)定性(Stability):包括試劑盒在儲(chǔ)存條件下的穩(wěn)定性以及使用過(guò)程中的穩(wěn)定性。這確保了試劑盒在有效期內(nèi)能夠保持其檢測(cè)性能。
5. 批間一致性(Lot-to-Lot Consistency):不同批次的試劑盒應(yīng)該具有相近的性能,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可比性和可重復(fù)性。
6. 標(biāo)準(zhǔn)曲線(Standard Curve):應(yīng)該是可重復(fù)的,且具有良好的線性關(guān)系,這允許從樣品讀數(shù)中準(zhǔn)確推算出目標(biāo)物質(zhì)的濃度。
……
相關(guān)在選購(gòu)試劑盒前,需要查看或咨詢廠家相關(guān)信息,確定試劑盒質(zhì)量可靠、符合實(shí)驗(yàn)需求。
04 選擇可靠的供應(yīng)廠家
訂購(gòu)ELISA試劑盒時(shí),選擇可靠的品牌能事半功倍。選擇美譽(yù)度高且可靠的ELISA試劑盒品牌時(shí),可以遵循以下考慮因素:
※ 在選購(gòu)前,可參考專業(yè)雜志、科研論壇以及社交媒體上的品牌排名和用戶評(píng)價(jià)。
※ 關(guān)注廠家是否具備專-利技術(shù),這往往表明品牌在研發(fā)方面投入較多,產(chǎn)品質(zhì)量更可靠。
※ 檢查品牌的產(chǎn)品是否在同行評(píng)審的科學(xué)文獻(xiàn)中有引用,這可以作為產(chǎn)品性能和可信度的間接證明。許多可靠品牌會(huì)主動(dòng)分享其產(chǎn)品在科研論文中的應(yīng)用案例。
※ 查看品牌是否公開(kāi)透明地提供了產(chǎn)品的性能參數(shù),如靈敏度、特異性、線性范圍和穩(wěn)定性等。
※ 查看廠商是否能夠提供良好的客戶服務(wù)和支持系統(tǒng),包括技術(shù)支持、實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)、退換貨政策等,可以提供額外的信心和便利。
※ 了解品牌的庫(kù)存狀況和交貨速度,特別是對(duì)于急需或常規(guī)使用的試劑盒。
通過(guò)綜合考量以上因素,您可以更有把握地找到一個(gè)美譽(yù)度高、質(zhì)量可靠且能滿足您實(shí)驗(yàn)需求的ELISA試劑盒品牌。在做出決定之前,不妨聯(lián)系售前服務(wù),進(jìn)一步了解產(chǎn)品細(xì)節(jié)和服務(wù)政策。
05 選擇性價(jià)比高的產(chǎn)品/更省錢(qián)地購(gòu)買(mǎi)產(chǎn)品
在滿足其他需求的前提下,比較待選試劑盒的價(jià)格,考慮到總成本不僅包括試劑盒本身,還有可能的后續(xù)成本,如額外的實(shí)驗(yàn)耗材或多次重復(fù)實(shí)驗(yàn)的費(fèi)用;在保證性能的前提下,價(jià)格適中,性價(jià)比高。如果您有定期使用某種ELISA試劑盒的需求或大量訂購(gòu)的需要,可以詢問(wèn)廠家是否有批量購(gòu)買(mǎi)的優(yōu)惠,這可能降低單位成本。
如果有特殊的實(shí)驗(yàn)需求,可以了解品牌是否提供定制服務(wù),這可能在某些情況下提供更高的性價(jià)比。
此外,單價(jià)太低的試劑盒需要引起警惕,可能是部分“黑心廠家"生產(chǎn)的假貨,如果價(jià)格顯著低于市場(chǎng)平均價(jià),應(yīng)警惕可能的假貨風(fēng)險(xiǎn)。
以上就是我們本次分享的“挑選ELISA試劑盒可以注意的事項(xiàng)",你學(xué)會(huì)了嗎?
關(guān)于欣博盛生物:
欣博盛生物科技有限公司成立于2007年,是一家力耕于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域的高新技術(shù)企業(yè),專門(mén)從事以ELISA產(chǎn)品為主的生物試劑研發(fā)與銷售,致力于為廣大研究人員提供高品質(zhì)的科研產(chǎn)品。
欣博盛研發(fā)生產(chǎn)中心擁有完整的酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒研發(fā)和生產(chǎn)平臺(tái),研發(fā)生產(chǎn)團(tuán)隊(duì)由具有近30年免疫檢測(cè)行業(yè)經(jīng)驗(yàn)的專家?guī)ьI(lǐng),由具有生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、檢驗(yàn)學(xué)等相關(guān)專業(yè)和研發(fā)經(jīng)驗(yàn)的人員組成。廣泛與歐美知-名的抗原抗體生產(chǎn)公司和機(jī)構(gòu)開(kāi)展合作,篩選和委托定制高質(zhì)量的原料,采用行業(yè)內(nèi)質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)來(lái)研發(fā)生產(chǎn)ELISA試劑盒。公司自主研發(fā)的ELISA試劑盒在國(guó)內(nèi)眾多重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室廣泛使用,深受廣大科研人員的好評(píng)。欣博盛品牌 ELISA試劑盒自推出以來(lái)已先后在Nature, Cell, PNAS等國(guó)際期刊中被引用。
欣博盛生物現(xiàn)可提供三百余種不同指標(biāo)ELISA試劑盒,涵蓋各類常用指標(biāo),更可提供ELISA定制與代測(cè)服務(wù)。更多詳情,歡迎咨詢欣博盛生物!