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更新時(shí)間:2016-07-13
TLR9激動(dòng)劑-CpG ODNs*供應(yīng)商欣博盛生物,法國(guó)品牌InvivoGen*代理商,貨期穩(wěn)定,專業(yè)技術(shù)服務(wù)團(tuán)隊(duì)。
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InvivoGen的CpG ODNs 優(yōu)勢(shì)
· 涵蓋zui全的CpG寡聚脫氧核苷酸 (CpG ODN)或細(xì)菌DNA
· 生物學(xué)活性檢測(cè)
· 隨產(chǎn)品提供去內(nèi)毒素水
· 高溶解度
CpG ODNs 是合成的單鏈DNA短片段,含有特定的非甲基化CpG二核苷酸序列。CpG ODNs含有部分或全部磷硫酰骨架(phosphorothioated (PS) backbone)。與細(xì)菌基因組DNA的磷酸二酯骨架相對(duì)(phosphodiester (PO) backbone)。
三個(gè)主要刺激性CpG ODNs的分類,是基于其結(jié)構(gòu)特性與在人外周血單核細(xì)胞(PBMC),某些B細(xì)胞和 類漿樹(shù)突細(xì)胞(pDC)的活性而劃分。三類CpG ODNs是Class A (Type D), Class B (Type K) 和Class C。
Classes of CpG ODNs
- CpG-A ODNs 以含有CpG回文序列為中西的PO骨架和PS修飾的3’端poly-G鏈構(gòu)成。CpG-A ODNs刺激類漿樹(shù)突細(xì)胞(pDC)可以較強(qiáng)的產(chǎn)生IFN-a,但是會(huì)較弱的激活TLR9依賴的NF-kB信號(hào)通路,產(chǎn)生較少的促炎性細(xì)胞因子(如白細(xì)胞介素6)。
- CpG-B ODNs 是包含一個(gè)或多個(gè)CpG二核苷酸的完整PS骨架結(jié)構(gòu)序列。CpG-B ODNs可以較強(qiáng)的活化B細(xì)胞和TLR9介導(dǎo)的NF-kB信號(hào),但刺激分泌IFN-a的效果較弱。
- CpG-C ODNs 結(jié)構(gòu)是Class A和B的混合體。它包含了完整的PS骨架和CpG回文序列。CpG-C ODNs可以較強(qiáng)的引起pDC分泌IFN-a,在刺激B細(xì)胞時(shí)也可以得到較好的效果。
Class A
Class A (type D) CpG ODNs (CpG-A ODNs) 以含有CpG回文序列為中西的PO骨架和PS修飾的3’端poly-G鏈構(gòu)成。
Poly G 末端在分子間形成四分體,從而產(chǎn)生高分子量結(jié)構(gòu)。這樣的結(jié)構(gòu)增強(qiáng)了穩(wěn)定性與內(nèi)涵體的胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn),促使大量IFN-a的產(chǎn)生和pDCs的成熟。
CpG-A ODNs也是NK細(xì)胞的強(qiáng)活化劑,其作用是通過(guò)間接的細(xì)胞因子信號(hào)來(lái)達(dá)到活化效果。
Ballas ZK. et al., 1996. Induction of NK activity in murine and human cells by CpG motifs in oligodeoxynucleotides and bacterial DNA. J Immunol. 157(5):1840-5. Krug A. et al., 2001. Identification of CpG oligonucleotide sequences with high induction of IFN-alpha/beta in plasmacytoid dendritic cells. Eur J Immunol. 31(7):2154-63. Verthelyi D. et al., 2001. Human peripheral blood cells differentially recognize and respond to two distinct CPG motifs. J Immunol. 166(4):2372-7.
Class A CpG ODNs 刺激 HEK-Blue™ hTLR9 細(xì)胞 (貨號(hào):hkb-htlr9)
用不同濃度的A-class CpG ODNs, ODN 1585, ODN 2216 或 ODN 2236及相應(yīng)的對(duì)照ODNs 刺激HEK-Blue™ hTLR9 細(xì)胞 (表達(dá)人源TLR9和NF-κB誘導(dǎo) SEAP 報(bào)告基因, 刺激物與HEK-Blue Detection試劑共孵育24 小時(shí), NF-ΚB-誘導(dǎo) SEAP的水平在OD 655 nm檢測(cè)。
Class A CpG ODNs 刺激 HEK-Blue™ mTLR9 細(xì)胞 (貨號(hào):mkb-htlr9)
用不同濃度的A-class CpG ODNs, ODN 1585, ODN 2216 或 ODN 2236及相應(yīng)的對(duì)照ODNs 刺激HEK-Blue™ mTLR9 細(xì)胞 (表達(dá)鼠源TLR9和NF-κB誘導(dǎo) SEAP 報(bào)告基因, 刺激物與HEK-Blue Detection試劑共孵育24 小時(shí), NF-ΚB-誘導(dǎo) SEAP的水平在OD 655 nm檢測(cè)。
Class B
Class B (type K) CpG ODNs (CpG-B ODNs)是18-28摩爾的線性脫氧寡核苷酸。CpG-B ODNs 是包含一個(gè)或多個(gè)6摩爾CpG二核苷酸的完整PS骨架結(jié)構(gòu)序列。人源的*序列是GTCGTT[1],鼠源的*序列是GACGTT[2]。
CpG-B ODNs是B細(xì)胞和NK細(xì)胞的強(qiáng)刺激劑,對(duì)于IFN-a分泌的刺激效果卻較弱[3,4]。CpG-B ODNs表現(xiàn)出較好的抗腫瘤效果以及Th1型佐劑的活性。
Hartmann G & Krieg AM., 2000. Mechanism and function of a newly identified CpG DNA motif in human primary B cells. J Immunol. 164(2):944-53. 2- Krieg AM. et al., 1995. CpG motifs in bacterial DNA trigger direct B-cell activation. Nature. 374(6522):546-9. 3- Hartmann G. et al., 2000. Delineation of a CpG phosphorothioate oligodeoxynucleotide for activating primate immune responses in vitro and in vivo. J Immunol. 164(3):1617-24. 4- Gürsel M. et al., 2002. Differential and competitive activation of human immune cells by distinct classes of CpG oligodeoxynucleotide. J Leukoc Biol. 71(5):813-20.
Class B CpG ODNs 刺激 HEK-Blue™ hTLR9 細(xì)胞 (貨號(hào):hkb-htlr9)
用不同濃度的B-class CpG ODNs, ODN 1668, ODN 1826, ODN 2006 或 ODN 2007及相應(yīng)的對(duì)照ODNs 刺激HEK-Blue™ hTLR9 細(xì)胞 (表達(dá)人源TLR9和NF-κB誘導(dǎo) SEAP 報(bào)告基因, 刺激物與HEK-Blue Detection試劑共孵育24 小時(shí), NF-ΚB-誘導(dǎo) SEAP的水平在OD 655 nm檢測(cè)。
Class B CpG ODNs 刺激 HEK-Blue™ mTLR9 細(xì)胞 (貨號(hào):mkb-htlr9)
用不同濃度的B-class CpG ODNs, ODN 1668, ODN 1826, ODN 2006 或 ODN 2007及相應(yīng)的對(duì)照ODNs 刺激HEK-Blue™ mTLR9 細(xì)胞 (表達(dá)鼠源TLR9和NF-κB誘導(dǎo) SEAP 報(bào)告基因, 刺激物與HEK-Blue Detection試劑共孵育24 小時(shí), NF-ΚB-誘導(dǎo) SEAP的水平在OD 655 nm檢測(cè)。
Class C
Class C CpG ODNs (CpG-C ODNs)結(jié)構(gòu)是Class A和B的混合體。它包含了完整的PS骨架和CpG回文序列。
C-Class CpG ODNs可以較強(qiáng)的引起pDC分泌IFN-a,在刺激B細(xì)胞時(shí)也可以得到較好的效果。C-Class CpG ODNs是很強(qiáng)的Th1-誘導(dǎo)性佐劑。
Vollmer J. et al., 2004. Characterization of three CpG oligodeoxynucleotide classes with distinct immunostimulatory activities. Eur J Immunol. 34(1):251-62.
Class C CpG ODNs 刺激 HEK-Blue™ hTLR9 細(xì)胞 (貨號(hào):hkb-htlr9)
用不同濃度的C-class CpG ODNs, ODN 2395 或 ODN M362及相應(yīng)的對(duì)照ODNs 刺激HEK-Blue™ hTLR9 細(xì)胞 (表達(dá)人源TLR9和NF-κB誘導(dǎo) SEAP 報(bào)告基因, 刺激物與HEK-Blue Detection試劑共孵育24 小時(shí), NF-ΚB-誘導(dǎo) SEAP的水平在OD 655 nm檢測(cè)。
Class C CpG ODNs 刺激 HEK-Blue™ mTLR9 細(xì)胞 (貨號(hào):mkb-htlr9)
用不同濃度的C-class CpG ODNs, ODN 2395 或 ODN M362及相應(yīng)的對(duì)照ODNs 刺激HEK-Blue™ mTLR9 細(xì)胞 (表達(dá)鼠源TLR9和NF-κB誘導(dǎo) SEAP 報(bào)告基因, 刺激物與HEK-Blue Detection試劑共孵育24 小時(shí), NF-ΚB-誘導(dǎo) SEAP的水平在OD 655 nm檢測(cè)。
正確選擇ODN類型
Class A CpG ODNs | Class B CpG ODNs | Class C CpG ODNs |
應(yīng)用: | 應(yīng)用: | 應(yīng)用: |
刺激 pDCs | 刺激 B 細(xì)胞 | 混合CpG A和CpG B的功能 |
誘導(dǎo) IFN-a 產(chǎn)生 | 活化NF-kB | |
疫苗佐劑 | ||
產(chǎn)品: | 產(chǎn)品: | 產(chǎn)品: |
ODN 2216 (human preferred) | ODN 1826 (mouse) | ODN 2395 (human/mouse) |
ODN 1585 (mouse) | ODN 1668 (mouse) | ODN M362 (human/mouse) |
ODN 2336 (human preferred) | ODN 2006 (human preferred) | |
ODN BW006 (human/mouse) | ||
ODN 2007 (Bovine/porcine) | ||
ODN D-SL01 (Multispecies) |
Class | Backbone | B cells | pDCs | IFN-α | Il-6 |
A | PS-PO | + | ++++ | ++++ | + |
B | PS | ++++ | ++++ | + | +++ |
C | PS | +++ | +++ | +++ | ++ |
ODN的品質(zhì)經(jīng)專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),并發(fā)表文獻(xiàn)
綠字部分:實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,從InvivoGen購(gòu)買的CpG-C, 不同批次的產(chǎn)品刺激細(xì)胞并產(chǎn)生IgG的效果均一穩(wěn)定,而從Sigma 和Coley購(gòu)買的產(chǎn)品活性則非常不連續(xù)